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人非神经元性烯醇化酶(NNE)ELISA试剂盒使用指南 - 人生就是博,尊龙凯时品牌呈现

发布时间:2025-08-20   信息来源:金亮江

本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断检测。该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。步骤如下:

人非神经元性烯醇化酶(NNE)ELISA试剂盒使用指南 - 人生就是博,尊龙凯时品牌呈现

试剂盒使用方法

首先,将样品、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入已包被adropin(AD)抗体的微孔中,进行温育并彻底清洗。之后,添加TMB底物,TMB在过氧化物酶的催化下会转变为蓝色,随后在酸的作用下变成黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)浓度呈正相关。最后,利用酶标仪在450nm波长下测定光密度(OD值),并计算样品浓度。

试剂盒组成

本试剂盒的成分如下:

  • 微孔酶标板:96孔配置(12孔×8条)、48孔配置(12孔×4条)
  • 标准品:03mL*6管
  • 样本稀释液:6mL(96孔配置)/3mL(48孔配置)
  • 检测抗体-HRP:10mL(96孔配置)/5mL(48孔配置)
  • 20×洗涤缓冲液:25mL(96孔配置)/15mL(48孔配置)
  • 底物A:6mL(96孔配置)/3mL(48孔配置)
  • 底物B:6mL(96孔配置)/3mL(48孔配置)
  • 终止液:6mL(96孔配置)/3mL(48孔配置)
  • 封板膜:2张
  • 说明书:1份
  • 自封袋:1个

注:标准品(S0-S5)的浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂盒应保存在2-8℃,有效期为6个月。

样品的收集、处理与保存

血清样本应在不含热原和内毒素的试管中收集,避免细胞刺激。血液收集后,需在3000转下离心10分钟以分离血清和红细胞。

血浆应使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,离心30分钟后取上清。细胞上清液同样需要离心去除颗粒和聚合物。

组织样本则需加入生理盐水并捣碎,之后离心10分钟取上清。如果未能及时检测,样本应分装后存放在-20℃,避免重复冻融。

自备设备

  • 酶标仪(450nm)
  • 高精度加样器及枪头(05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)
  • 恒温箱(37℃)

操作步骤与注意事项

从冷藏环境取出试剂盒后,应在室温下平衡15-30分钟后方可使用;若未用完的试剂板应存放于密封袋中。洗涤液如有结晶,稀释时可用温水帮助溶解。所有加样操作应使用加样器,确保准确性,避免实验误差;加样时间控制在5分钟内。

需同时做标准曲线,并尽量多做复孔。如样本内容过高,需做稀释;同时,封板膜为一次性使用,严格按照说明书操作确保结果可靠。

注意保存底物时应避免光照,并按照传染病处理所有样品和废弃物。本试剂不同批号的成分不得混用。

温馨提示:本公司提供代测服务,凡购买人生就是博-尊龙凯时的Elisa试剂盒均可享受免费的Elisa代测服务。如需了解更多,请咨询销售经理或在线客服。